Sebaik sahaja sel yang kita kultur masuk

kilang seltercemar, kebanyakannya sukar dikendalikan.Jika sel yang tercemar itu berharga dan sukar diperoleh semula, kaedah berikut boleh digunakan untuk membuangnya.

1. Gunakan antibiotik

Antibiotik lebih berkesan untuk membunuh bakteria dalamkilang sel.Ubat gabungan lebih berkesan daripada ubat sahaja.Ubat pencegahan adalah lebih berkesan daripada ubat selepas tercemar.Ubat pencegahan biasanya menggunakan antibiotik berganda (penisilin 100u/mL ditambah streptomycin 100μg/mL).Selepas pencemaran, kaedah pembersihan perlu 5 hingga 10 kali lebih besar daripada jumlah biasa.Ubat harus digunakan selama 24 hingga 48 jam selepas penambahan, dan kemudian diganti dengan rutin biasa.Cecair kultur.Kaedah ini mungkin berkesan pada peringkat awal pencemaran.Sebagai tambahan kepada penisilin dan streptomisin, antibiotik yang digunakan juga boleh termasuk gentamicin, kanamisin, polimiksin, tetrasiklin, nystatin, dll. Yang biasa digunakan ialah 400 hingga 800 μg/mL kanamisin atau 200 μg/mL tetrasiklin.Medium ditukar setiap 2 hingga 3 hari dan diteruskan selama 1 hingga 2 generasi untuk rawatan.Dalam tahun-tahun kebelakangan ini, telah dilaporkan bahawa 4-fluoro, 2-hydroxyquinoline (Ciprofloxacin, Cip), derivatif Pleu-romutilin (derivatif Pleu-romutilin, BM-Cyclin2: BM-1 dan derivatif tetracycline (BM-2)) adalah berkesan dalam membunuh mycoplasma apabila digunakan secara bersendirian atau dalam kombinasi.Ketiga-tiga antibiotik ini semuanya disediakan ke dalam larutan pekat 250X dalam PBS dan disimpan pada -20°C untuk kegunaan kemudian.Kepekatan penggunaan Cip ialah 10 μg/mL, BM-1 ialah 10 μg/mL, dan BM-2 ialah 5μg/mL.Apabila menggunakan, mula-mula aspirasikan medium kultur yang tercemar, tambahkan medium kultur RPMI1640 yang mengandungi BM-1, kemudian aspirasikan medium kultur selepas 3 hari, tambahkan medium kultur RPMI1640 yang mengandungi BM-2, dan biakan selama 4 hari, dan seterusnya selama 3 hari berturut-turut .pusingan, sehingga dibuktikan dengan mikroskop pewarnaan pendarfluor 33258 bahawa mikoplasma telah dihapuskan, kemudian medium kultur normal ditambah untuk kultur dan laluan 3-4 kali.

2. Rawatan pemanasan

Mengeramkan kultur tisu yang tercemar pada suhu 41°C selama 18 jam boleh membunuh mycoplasma, tetapi mempunyai kesan buruk pada sel.Oleh itu, ujian awal perlu dijalankan sebelum rawatan untuk meneroka masa pemanasan yang boleh membunuh mycoplasma ke tahap maksimum dan mempunyai kesan paling sedikit pada sel.Kaedah ini kadangkala tidak boleh dipercayai.Jika dirawat dengan ubat terlebih dahulu dan kemudian dipanaskan pada 41°C, kesannya akan menjadi lebih baik.

3. Gunakan serum khusus mycoplasma

Pencemaran Mycoplasma boleh disingkirkan dengan 5% serum imun mycoplasma arnab (titer hemaglutinasi 1:320 atau ke atas).Oleh kerana antibodi spesifik boleh menghalang pertumbuhan mycoplasma, ia bertukar negatif 11 hari selepas rawatan antiserum dan kekal negatif 5 bulan kemudian.adalah negatif.Walau bagaimanapun, kaedah ini lebih menyusahkan dan tidak semudah dan menjimatkan seperti menggunakan antibiotik.

4. Kaedah lain

Sebagai tambahan kepada kaedah penyingkiran pencemaran yang dinyatakan di atas, terdapat juga kaedah inokulasi dan pensterilan pada haiwan, kaedah fagositosis makrofaj, kaedah menambah bromouracil kepada tercemar.botol kulturdan kemudian menyinarinya dengan cahaya, dan kaedah penapisan, dsb., tetapi semuanya lebih menyusahkan dan tidak berkesan.Oleh itu, sebaik sahaja pencemaran mikoplasma berlaku, melainkan ia mempunyai nilai yang sangat penting, ia biasanya dibuang dan dikultur semula.

sila hubungi Whatsapp & Wechat : +86 180 8048 1709